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新进展!SCI刊文揭示,上转发光方法快速检测新冠抗体能预测中和抗体保护率

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发表于 2022-3-8 21:02:48 | 显示全部楼层 |阅读模式
2月3日,来自军事医学科学院微生物流行病研究所、生物应急与临床POCT(北京市)重点实验室等机构的研究人员在BMC Microbiology发表了一篇名为《Development and multi-center clinical trials of an up-converting phosphor technology-based point-of-care (UPT-POCT) assay for rapid COVID-19 diagnosis and prediction of protective effects》的文章。

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研究人员建立了一种基于上转发光技术的即时检测(UPT-POCT)方法,不仅可以快速诊断COVID-19,还能预测血清中和抗体 (Neutralizing Antibody, NAb) 活性和保护作用。

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研究人员针对新冠病毒S蛋白受体结合结构域(Receptor binding domain,RBD)建立起一种双抗原夹心法,用于检测血清中抗新冠病毒S-RBD的总抗体。此前有研究证实S-RBD是新冠病毒中和抗体主要的抗原表位,针对S-RBD产生的特异性抗体可以阻断新冠病毒与血管紧张素转化酶ACE2结合,从而使病毒不能入侵宿主细胞,起到“中和”病毒的作用[1-3]。无论是自然感染还是主动免疫,只要是产生抗S-RBD的抗体,就能起到一定的中和作用。

因此,对S-RBD特异性抗体的定量检测不仅可以作为新冠病毒感染诊断的依据,还可以预测中和活性和NAbs保护作用。

该研究中通过采集测试(T)和对照(C)的上转发光信号,将峰值之比(即T/C比)定义为检测结果,是一种定量检测方法。在对恢复期COVID-19患者血清样本进行检测后发现,UPT-POCT的T/C比不仅与ELISA检测的OD值显著相关,还具有比ELISA更低的检测限和更宽的检测范围。当临界值定义为0.25,UPT-POCT的诊断敏感性和特异性分别为98.6%和99.86%。

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此外,该研究验证了NAb滴度很大程度上代表了中和抗体的保护作用,同时发现用UPT-POCT检测的T/C比与NAb滴度呈强正相关,与累积复阳率呈强负相关。

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UPT-POCT的T/C值与中和抗体滴度呈正相关

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UPT-POCT的T/C值与累积复发阳性率呈负相关

目前用于新冠感染诊断的PCR方法,以及用于中和抗体检测的中和实验均存在操作复杂,检测耗时较长等问题,急需一种快速诊断新冠感染和评价中和抗体保护作用的方法。

相关研究
UPT-POCT操作简便,检测快速,15分钟出结果,其检测SARS-CoV-2总抗体的灵敏度为89.15%,特异性为 99.75%(n = 782)。该方法对S-RBD总抗体的定量检测结果与恢复期COVID-19患者以及接种疫苗的人群的血清NAb滴度显著相关,对于保护率预测有一定的意义。

总之,这一技术可作为快速诊断新冠感染和预测中和保护作用的替代方法。

【参考文献】

[1].Premkumar, L. et al. The receptor binding domain of the viral spike protein is an immunodominant and highly specific target of antibodies in SARS-CoV-2 patients. Sci. Immunol. 5, eabc8413 (2020).

[2].Wan, J. et al. Human-IgG-neutralizing monoclonal antibodies block the SARS-CoV-2 infection. Cell Rep. 32, 107918 (2020).

[3].Yuan, M., Liu, H., Wu, N. C. & Wilson, I. A. Recognition of the SARS-CoV-2 receptor binding domain by neutralizing antibodies. Biochem. Biophys. Res. Commun. https://doi. org/10.1016/j.bbrc.2020.10.012 (2020).

编辑:任里程  审校:小冉

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